基于细胞铁死亡探讨加味七方胃痛颗粒治疗胃癌的分子机制研究

目的:探讨加味七方胃痛颗粒对胃癌Pine tree derived biomass细胞的效应及抑制细胞铁死亡的分子机制。方法:选取SD雄性大鼠共20只,每只体重300g左右,7~8周龄。中药加味七方胃痛颗粒干预7天,制备含药血清。AGS细胞此网站复苏和传代后,将胃癌AGS细胞随机分为空白对照组(CK&AGS组)、空白血清组和含药血清组。干预2天,对各组进行细胞活性检测(CCK8法),倒置荧光显微镜观察细胞形态,比色法检测MDA、GSH的含量,qRT-PCR和Western Blotting检测SLC7A11、P53、GPX4的表达变化水平。结果:1.CCK8结果显示,AGS细胞在显微镜下观察为上皮样贴壁生长,正常组细胞生长状态良好,与AGS组相比,空白血清组细胞在显微镜下观察各组差异不大,说明空白血清对细胞增殖无显著影响,20%含药血清作用细胞48 h后可在显微镜下明显观察到细胞收缩变圆增多,细胞数量减少,说明细胞增殖被显著抑制(p<0.05),40%含药血清作用细胞24 h后可在显微镜下明显观察到细胞收缩变圆增多,细胞数量减少,说明细胞增殖被显著抑制(p<0.05),后续选择40%含药血清作用细胞24Etoposide配制 h进行实验。2.CCK8结果显示,AGS细胞在显微镜下观察为上皮样贴壁生长,正常组细胞生长状态良好,与CK组相比,空白血清组细胞在显微镜下观察各组差异不大,说明空白血清对细胞增殖无显著影响,而含药血清作用细胞后可在显微镜下明显观察到细胞收缩变圆增多,细胞数量减少,说明细胞增殖被显著抑制(p<0.05)。3.qRT-PCR结果显示,与CK组相比,AGS组含药血清可使胃癌AGS细胞内SLC7A11、GPX4的表达水平显著降低(p<0.05),P53的表达水平显著升高(p<0.05)。4.Western Blot结果显示,与CK组相比,AGS组含药血清可使胃癌AGS细胞内SLC7A11、GPX4的表达水平显著降低,P53的表达水平显著升高(p<0.05)。5.MDA结果显示,与CK组相比,AGS组含药血清可使胃癌AGS细胞内MDA的表达水平显著降低(p<0.05)。6.GSH结果显示,与CK组相比,AGS组含药血清可使胃癌AGS细胞内GSH的表达水平显著升高(p<0.05)。结论:加味七方胃痛颗粒可以显著抑制胃癌细胞的增殖,其抑癌效应可能与抑制细胞铁死亡信号有关。