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背景:随着心肺复苏技术的不断革新和广泛的社会普及,心脏骤停心肺复苏后自主循环恢复率能达到50%,但远期仅有不到5%患者具有良好的神经功能预后,复苏后脑神经细胞突触功能损伤一直是导致心肺复苏远期预后差的最主要原因,修复复苏后脑神经细胞突触功能在改善神经功能预后方面具有重大作用。有研究表明Syndecan3(SDC3)是神经元缺氧损伤后突触生长及修复的重要因子,并递呈Pleiotrophin(PTN)信号传递至神经细胞内,参与了突触迁移、神经元生长发育等作用,同时SDC3是机体内源性神经细胞膜表面特异性硫酸乙酰肝素蛋白多糖,其膜外区域的硫酸乙酰肝素与临床常用的外源性肝素具有高度结构相似性。因此研究肝素是否通过影响PTN/Syndecan3途径改善大鼠复苏后脑功能及神经元突触生长,为心肺复苏后脑功能保护提出新的治疗策略具有重要意义。目的:临床验证PTN、SDC3与CA-CPR患者神经功能恢复相关;动物水平验证肝素改善大鼠心肺复苏后脑神经功能及PTN、SDC3的表达;细胞水平探讨肝素在海马神经元OGD/R模型中对PTN/SDC3途径作用靶点。方法:临床研究选取心脏骤停心肺复苏且达到自主循环恢复的患者,记录患者复苏后7天内GCS、TICS-m评分及CPC分级和生存情况,分别采集复苏后2小时至7天的血液,检测血清中PTN、SDC3及神Antineoplastic and I抑制剂经特异性烯醇化酶(NSE)的表达情况,分析复苏后神经功能评分与血清PTN、SDC3和NSE的相关性,通过ROC曲线下面积(AUC)检验血清学指标预测神经功能预后及死亡的能力。采用SD大鼠建立窒息性心脏骤停心肺复苏模型,随机分为假手术组(Sham,S)、肝素组(Heparin,H)和生理盐水组(Control,C)通过神经行为学方法评估复苏后7天内脑神经功能变化,检测肝素对大鼠复苏后脑组织及血清中PTN、SDC3及NF200表达情况,通过尼氏染色评估复苏后脑损伤程度,通过干湿比检测复苏后脑组织含水量变化,采用免疫荧光染色分析脑组织海马区PTN、SDC3、NF200及Tau蛋白表达情况。采用小鼠海马神经元细胞(HT22)制备糖氧剥夺/复糖氧(OGD/R)模型,模拟海马神经元细胞缺血缺氧再灌注损伤。检测肝素对OGD/R干预HT22后的PTN、SDC3及NF200表达情况,通过免疫荧光染色定位PTN、SDC3及NF200在海马神经元细胞上的表达情况,通过慢病毒感染方法筛选PTN和SDC3持续敲低表达的HT22细胞系,检测肝素对OGD/R干预PTN和SDC3持续敲低表达的HT22中PTN、SDC3、NF200及PSD95的表达情况,明确肝素在PTN/SDC3途径中的作用靶点。结果:1.23例心脏骤停心肺复苏患者复苏7天内GCS和TICS-m两种评分方法对评估复苏后患者脑神经功能具有相似效力,两种评分方法具有完全线性相关,相关性R=0.9970,P<0.05。复苏后7天内血清PTN和SDC3产生变化,血清NSE、PTN和SDC3指标预测7天死亡能力分别为AUC_(PTN)=0.8917,AUC_(SDC3)=0.8333,AUC_(NSE)=0.6964,根据CPC分级区分复苏后轻度神经功能障碍和重度神经功能障碍患者,发现复苏后PTN在6h,SDC3在2h和6h,NSE在1d时两组差异有统计学意义(P<0.05)。2.总体大鼠复苏后ROSC发生率为79.65%,H组为84.31%,C组为75.81%,大鼠复苏成功率比较差异无统计学意义(P>0.05);C和H组体重点击此处较S组降低(P<0.05);C组和H组之间比较窒息至心脏骤停时间(T_(A-C))、开始心肺复苏至自主循环恢复时间(T_(C-R))、自主循环恢复至拔管时间(T_(R-E))及7天存活率差异均无统计学意义(P>0.05);复苏后H组脑神经功能较C组比较差异有统计学意义(P<0.05);复苏后7天内三组之间大鼠脑组织含水量比较差异有统计学意义(P<0.05);复苏后总体1天、3天和7天C组和H组脑组织中PTN、SDC3及NF200表达差异有统计学意义(P<0.05);H组和C组比较血清中PTN在3天和7天、NF200在1天差异有统计学意义(P<0.05),SDC3在两组间比较差异无统计学意义(P>0.05);免疫荧光结果表明C组和H组比较海马神经元区域的SDC3、NF200和Tau在复苏后1天以及Tau在复苏后3天差异无统计学意义(P>0.05),其他时间点两组之间海马神经元中PTN、SDC3、NF200及Tau表达差异均具有统计学差异(P<0.05)。3.体外培养小鼠海马神经元HT22细胞在4u/100ul的肝素浓度下具有最佳活性;且HT22的慢病毒最佳MOI为120,感染增强液为A液;通过sh RNA-PTN和sh RNA-SDC3的慢病毒感染HT22经过稳定株单细胞克隆获得稳定持续敲减PTN和SDC3的HT22细胞系,其鉴定PTN和SDCm RNA表达与正常HT22比较差异具有统计学意义(P<0.05);HT22、HT22-OGD/R以及HT22-OGD/R-Hep三组细胞比较PTN和NF200m RNA和蛋白差异有统计学意义(P<0.05),三组间SDC3m RNA和蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05);HT22-PTN~-、HT22-PTN~–OGD/R和HT22-PTN~–OGD/R-Hep三组细胞PTN和SDC3m RNA和蛋白的表达差异均无统计学意义(P>0.05),NF200和PSD95m RNA和蛋白在HT22-PTN~-vs HT22-PTN~–OGD/R和HT22-PTN~–OGD/R vsHT22-PTN~–OGD/R-Hep之间差异有统计学意义(P<0.05);HT22-SDC3~-、HT22-SDC3~--OGD/R和HTAnaerobic hybrid membrane bioreactor22-SDC3~–OGD/R-Hep三组细胞PTNm RNA和蛋白表达差异均有统计学意义(P<0.05),SDC3m RNA和蛋白表达差异均无统计学意义(P>0.05),NF200和PSD95m RNA和蛋白在HT22-SDC3~-vsHT22-SDC3~–OGD/R和HT22-SDC3~-vs HT22-SDC3~–OGD/R-Hep之间差异有统计学意义(P<0.05)。结论:1.心脏骤停心肺复苏后患者血清中PTN和SDC3随神经功能恢复产生相应变化,且其能预测复苏后7天内死亡,与复苏后神经功能预后相关。2.窒息性心脏骤停大鼠心肺复苏模型能造成复苏后严重脑损伤,在复苏后3天损伤最为显著;3.肝素促进了复苏后7天内大鼠脑神经功能恢复,改善复苏后大鼠脑组织中PTN和NF200的表达水平,但在复苏后早期未能影响SDC3的表达;4.肝素可通过影响SDC3的功能上调PTN/SDC3途径介导了海马神经元细胞缺氧损伤后突触生长。

川佛手来源于芸香科植物佛手Citrus medica L.var.sarcodactylis Swingle,以未成熟果实纵切薄片干燥后入药。Wound infection佛手饮片宽端呈指状分裂,边缘表皮绿褐色或黄褐色,以片张完整、青皮白肉、气清香者为优。其药材性状特征与佛手鲜果的生长状态直接相关。本课题组在中药资源普查过程中发现部分佛手树上的果实形态不一,除常见的顶端指状结构闭合如拳、整体呈长圆形的正常果外,还有与柑橘形态相似、呈扁圆形的异形果。本研究首先对两种果实的外观品质进行评价,并通过转录组测序和基因家族分析,筛选调控异形果形成的关键基因,进一步借助酿酒酵母遗传转化体系、烟草瞬时表达体系与拟南芥遗传转化体系,对关键基因进行功能验证,初步揭示异形果形成的分子机制。本研究的主要结果如下:1)比较川佛手正常果与异形果的表观品质,包括果实大小、果皮色泽及色素含量。佛手正常果长圆形,有指状裂瓣,果形指数均大于1.2;异形果呈扁平状,果形指数在0.4-0.6。异形果的亮度值L*、偏黄值b*均高于正常果,偏绿值a*低于正常果。进一步测定表皮色素含量,异形果的总叶绿素与类胡萝卜素含量均低于正常果,但类胡萝卜素与总叶绿素含量的比值显著高于正常果。2)筛选调控异形果形成的关键基因。对川佛手正常果与异形果进行转录组分析,7个ABC转运蛋白家族基因在异形果中的基因表达量均低于正常果。在佛手中鉴定到119个ABC转运蛋白家族成员,筛选获得关键转运蛋白基因CmABCB19 与 CmABCC10。克隆到 CmABCB19 与 CmABCC10 基因全长 cDNA序列,并与已知功能的ABC转运蛋白进行序列相似度和保守结构域比对,推测CmABCB19转运蛋白可转运生长素IAA,CmABCC10转运蛋白可转运类黄酮成分。3)测定川佛手正常果和异形果中生长素及类黄酮成分含量。利用UPLC-3Q-MS测定川佛手生长素含量,结果表明佛手正常果中生长素IAA及IBA含量均高于异形果。利用UPLC-Q-TOF-MS对川佛手的类黄酮成分进行IACS-010759测定,通过OPLS-DA分析获得5种异形果和正常果的差异类黄酮成分,其中异形果中柚皮苷、香叶木苷和川陈皮素含量高于正常果,芦丁和橙皮素含量低于正常果。4)利用酿酒酵母遗传转化体系对转运蛋白进行功能分析。利用酿酒酵母野生型、突变株及互补突变株株系,在添加不同底物的培养基中进行孵育,在固定时间点测定酵母菌体中积累底物含量,进而推测CmABCB19蛋白在酵母细胞中具有生长素转出作用;CmABCC10蛋白在酵母细胞中具有介导柚皮苷、川陈皮素及香叶木苷转出,芦丁和橙皮素的转入作用。5)利用烟草瞬时转化体系对转运蛋白进行亚细胞定位分析,融合荧光蛋白显示,CmABCB19在细胞膜上表达,CmABCC10在液泡膜上表达。利用拟南芥遗传转化体系进行转运蛋白功能分析,与拟南芥突变株abcb19相比,abcb19-CmABCB19互补突变株中生长素生物合成与信号转导相关基因表达水平显著上调,生长素含量升高,同时芦丁和柚皮苷含量也升高,说明佛手CmABCB19可参与生长素转运积累,同时间接调控类黄酮成分的合成。与拟南芥突变株abcc10相比,abcc10-CmABCC10互补突变株中类黄酮合成相关基因表达水平显著上调,芦丁和柚皮苷含量升高,同时生长素含量也升高,说明CmABCC10可参与类黄酮成分的转运积累,同时对生长素的合成转运也有调控作用。同时,拟南芥中转运蛋ICI 46474体外白CmABCB19与CmABCC10对角果和种子发育也有影响。综上所述,推测在生长过程中佛手异形果ABC转运蛋白的表达水平受到抑制,导致果实中生长素及类黄酮成分含量减少,进而引发果实表观性状及内在品质特征改变。

目的：探讨艾灸联合术前强化肛提肌训练应用于经尿道前列腺电切术的Puromycin抑制剂逼尿肌不稳定良性前列腺增生(BPH)患者的效果。方法：根据随机数字表法将我院2021年1月—2022年1月103例经尿道前列腺电切术的逼尿肌不稳定BPH患者作为观察对象，两组患者均给予常规护理干预，其中训练组51例给予术前强化肛提肌训练，联合组52例在训练组的基础上联合艾灸干预，观察两组患者排尿情况、膀胱功能、尿失禁恢复及主观症状改善情况。结果：干预1个月、3个月后，联合组每日总尿量高于训练组，每日排尿次数及每日总Coroners and medical examiners漏尿次数少于训练组(P<0.05);联合组最大尿流率高于训练组，残余尿量少于训练组(P<0.05);干预1个月、3个月后，两组尿失禁生活质量问卷(I-QOL)各维度评分均升高，且联合组高于训练组(P<0.05);两组国际前列腺症状量表(IPSS)各维度评分均降低，且联合组低于训练组(P<0.05)。结论：对于逼尿肌不稳定BPH患者通过应用艾灸联合术前强化肛提肌训练能够有效控制排尿，改善膀胱功能及不良症状selleck LY294002，提高生活质量。

目的基于内质网应激研究脑泰方对缺血半暗带区神经细胞损伤的干预机制。方法在体研究:75只雄性SD大鼠,随机分为假手术组15只,模型组15只,脑泰方低剂量组15只,脑泰方中剂量组15只,脑泰方高剂量组15只,然后对模型组和脑泰方各组大鼠大脑中动脉栓塞再灌注(MCAO/R)进行手术造模。造模后相应药物灌胃饲养。采用Zea-longa评分法及平衡木评分法对大鼠神经肌肉功能和前庭运动功能进行评测、TTC染色观察梗死面积、HE染色观察脑缺血半暗带组织形态、免疫荧光双重染色及Western blot法检测脑组织及缺血半暗带区内质网应激及自噬相关标志蛋白表达情况。体外研究:采用PC12细胞进行缺氧缺糖/复氧复糖以体外模拟脑缺血再灌注损伤,设立正常组、模型组、4-PBA(内质网应激抑制剂)组、脑泰方低(10%)、中(15%)、高(20%)浓度组。采用CCK8法检测细胞活力,乳酸脱氢酶(LDH)测定试剂盒检测各组LDH活性、Hoechst 33258染色观察细胞核形态改变、Tunel染色检测细胞凋亡率、免疫荧光法及蛋白免疫印迹法检测受损PC12细胞内质网应激及自噬通路相关蛋白阳性表达。结果在体研究:(1)治疗前相比较,脑泰方各剂量组大鼠治疗后Zea-longa及平衡木评分均明显降低(P<0.05,P<0.01),与模型相比,脑泰方中、高剂量组大鼠治疗后Zea-longa及平衡木评分明显降低,(P<0.05,P<0.01);(2)模型组大鼠梗死体积明显增加(P<0.01),脑泰方各剂量组大鼠脑梗死体积均不同程度降低(P<0.05,P<0.01);(3)模型组大鼠神经细胞明显损伤,脑泰方各组大鼠神经细胞病理改变较轻微,相比于模型组有明显改善,神经细胞排列较整齐,数目较多;(4)模型组大鼠脑内缺血半暗带区Beclin-1、CHOP、GRP78、PERK及LC3Ⅱ阳性表达均明显增加(P<0.05,P<0.01),脑泰方各剂量组大鼠脑内缺血半暗带区Beclin-1、CHOP、GRP78、PERK及LC3Ⅱ阳性表达均不同程度减弱(P<0.05,P<0.01);与脑泰方中剂量组相比,脑泰方低、高剂量组大鼠脑内缺血半暗带区Beclin-1、CHOP、PERK及LC3Ⅱ阳性表达均不同程度增加(P<0.05,P<0.01),脑泰方低剂量组大鼠脑内缺血半暗带区GRP78阳性表达率明显增加(P<0.01)。体外研究:(1)模型组PC12细胞存活率下降,LDH活性增加(P<0.01),脑泰方中、高浓度组细胞存活率增加,LDH水平降低(P<0.05,P<0.01);(2)模型组细胞呈现出典型凋亡特征,脑泰方中、高浓度组凋亡细胞数目减少,细胞核皱缩减轻;(3)模型组细胞凋亡Legislation medical率显著增加(P<0.01),脑泰方中、高浓度组PC12细胞凋亡率不同程度降低(P<0.05,P<0.01);(4)模型组GRP78、PERK、CHOP、LC3Ⅱ、Beclin-1蛋白表达明显增加,LC3Ⅰ蛋白表达明显减少(P<0.Laduviglusib05,P<0.01),脑泰方中、高浓度组GRP78、PERK、CHOP、LC3Ⅱ、Beclin-1蛋白表达明显降低,LC3SBE-β-CDⅠ表达增加(P<0.05,P<0.01)。结论(1)脑缺血再灌注可导致半暗带区神经细胞内质网应激;内质网应激介导受损神经细胞过度自噬导致的细胞凋亡是脑缺血再灌注损伤的重要病理机制;(2)通过抑制内质网应激,降低内质网应激相关蛋白GRP78、PERK、CHOP表达,可缓解细胞过度自噬,降低LC3Ⅱ、Beclin1蛋白表达,抑制受损神经细胞凋亡率,发挥一定的神经保护作用;(3)脑泰方可调节内质网应激及细胞自噬相关蛋白的表达,从而减轻半暗带区受损神经细胞内质网应激及其介导的过度自噬状态,提高细胞存活率,减少脑梗死体积,改善神经功能,从而发挥防治脑缺血再灌注损伤的作用。

旨在筛选和鉴定与鸭补体调节因子Vitronectin(Vn)结合的鸭疫里默杆菌(Riemerella anatipestifer,R.anatipestifer)外膜蛋白。在酵母表达鸭Vn及间接免疫荧光和免疫斑点杂交试验检测鸭疫此网站里默杆菌结合Vn的基础上，以重组Vn为诱饵蛋白进行His pull-down及LC-MS/MS质谱鉴定，筛选外膜蛋白并进行生物信息学分析；原核表达候选外膜蛋白及截短片段，制备多克隆抗体，利用Far-Western blot验证与鸭Vn结合，并用间接ELISA测定肝素和氯化钠对结合的影响；测定Vn及抗外膜蛋白抗体对血清杀菌活性的影响。结果显示，鸭疫里默杆菌能在体外结合鸭Vn,经His-pull down、质谱鉴定及蛋白质结构分析，筛选出的外膜蛋白Oimmunizing pharmacy technicians (IPT)mp45具有β桶状结构及7个暴露于细胞膜外的多肽环；成功原核表达Omp45及截短片段，制备的抗Omp45多克隆抗体间接ELISA效价超过1∶12 800,Western blot检测多克隆抗体可以与重组蛋白发生特异性反应；Far-Western blot及间接ELISA结果显示，Omp45、包含2个及以上细胞膜外多肽环的截短片段同时以肝素和氯化钠敏感方式结合Vn;血清杀菌试验结果显示，鸭疫里默AZD1152-HQPA杆菌对缺乏Vn的健康鸭血清的抵抗力降低，在抑制补体经典激活途径条件下抗Omp45抗体也能极显著降低细菌在鸭血清中的存活率(P<0.01)。结果表明，成功筛选并鉴定了与鸭Vn结合的鸭疫里默杆菌外膜蛋白Omp45,为进一步阐明鸭疫里默杆菌致病机制奠定了基础。

目的 比较新疆维吾尔族、汉族、哈萨克族癫痫患儿HLA-B~*1502等位基因携带率和等位基因频率差异，评估HLA-B~*1502阳性患儿使用芳香环类抗癫痫药物（ASMs）诱发皮肤不良反应的风险。方法 回顾性收集2019年1月—2022年8月在我院就诊并在初次使用ASMs前采用荧光染色原位杂交测序技术检测HLA-B~*1502TA和HLAB~*1502TB基因型及用药指导的患儿460例，分析其基因型与皮肤型药物不良反应发生情况。结果 维、汉、哈族癫痫患儿的HLA-B~*1502基因突变率分别为47.41%,4Antipseudomonal antibiotics1.57%和54.84%。哈萨克族癫痫患selleckchem MK-4827儿的HLA-B~*1502杂合突变型基因显著高于汉族患儿（P <0.05）。维、汉、哈族癫痫患儿的HLA-B~*1502野生型基因组的体重指数均显著高于突变组患儿（P<0.05）。247例HLA-B~*1502野生型患儿继续服用芳香族ASMs后未发生皮LXH254采购肤不良反应，12例HLA-B~*1502纯合突变型患儿调整为其他作用机制的ASMs,201例HLA-B~*1502杂合突变型患儿中仍有56例继续使用芳香族ASMs，有5例患儿在用药3周内发生了斑丘疹、Stevens-Johnson综合征、中毒性表皮坏死松解症。结论 临床初次使用芳香族ASMs控制和治疗患儿癫痫发作过程中，有必要进行HLA-B~*1502基因检测。

目的：探讨上皮样胶质母细胞瘤伴Braf V600E突变型的影像学特征，以提高对本病的认识及诊断水平。方法：回顾性分析2017年3月—2023年1月于中山大学肿瘤AG-221临床试验防治中心经手术病理证实的8例上皮样胶质母细胞瘤伴Braf V600E突变型患者的临床资料以及影像学表现。CX-5461纯度结果：8例上皮样胶质母细胞瘤患者大脑半球均可见不同程度受累，1例病变位于额叶，1例病变位于颞叶，1例病变位于颞顶叶，2例病变位于额叶及顶叶，1例病变位于额叶及胼胝体，1例病变位于顶叶及左侧脑室三角区。4例伴不同程度囊变、坏死，8例均有明显瘤周水肿，两例出血，未见钙化。弥散加权成像（diffusion-weightedimaging,DWI）序列显示4例呈高Enfermedades cardiovasculares信号。8例患者完成MRI增强扫描，2例无强化，3例轻度强化，3例见环形、不均匀及明显强化。8例均存在不同程度占位效应。3例术后出现肿瘤复发。结论：上皮样胶质母细胞瘤伴Braf V600E突变型的影像学具有一些特定的表现，提高对本病的认识十分重要，明确诊断仍需依赖病理学以及免疫组织化学结果。

目的 评价哈尔滨市乳腺增生患者健康相关生命质量并分析其影响因素。方法 采用简单随机抽样方法随机选取2014年哈尔滨市某医院收治的269例乳腺增生患者作为调查对象，基于中国人群的欧洲五维健康量表效用值积分体系计算乳腺增生患者健康效应值，采用秩和检验和Tobit回归模Genetic reassortment型对乳腺增生患者健康水平影响因素进行分析。结果 269例乳腺增生患者在5个维度有困难的排序及占比依次为：焦虑或沮丧33.17%、疼痛或不适33.46%、日常活动11.90%、行动10.04%、自己照顾自己5.20%。基于中国人群的健康效用值积分体系计算乳腺增selleck NSC 127716生患者健康效应值为0.94。Tobit回归模型结果显示，年收入（β=selleck HPLC0.086）、哺乳（β=0.607）对乳腺增生患者的健康效用值得分差异有统计学意义（P<0.05）。结论 乳腺增生对患者心理方面的影响程度大于生理方面，应加大对乳腺增生患者心理方面的关注度。低收入、无哺乳史人群是乳腺增生防控的重点人群。

目的:探讨影响孕产妇下肢静脉血栓结局的危险因素。方法:回顾分析2021年1月至2022年1月承德医学院附属医院收治的58例发生下肢静脉血栓事件孕产妇的临床资料，根据血栓结局情况将其分为血栓完全消失组(34例)和血栓机化残留组(24例)。比较两组患者的临床特征、治疗方式及实验室指标，多因素logistic回归分析影响孕产妇下肢静脉血栓结局的独立危险因素。结果:产次、血栓形成部位、产前产后血红蛋白差值、产前产后血小板差值与下肢静脉血栓结局具有一定相关性(P<0.05)。多因素logistic回归分析结果显示，经产(aOR=0.268,95%CI为0.079～0.909)是血栓机化残留的保护因素，相对产前产后PLT差值(6～此网站40)×10~9/L,产前产后PLT差值<6×10~9/L(aOR=0.076,95%CI为0.008～0.680)为血栓机化残留的Congenital CMV infection保护因素。结论:产前产后血小板差值越小，静脉血栓完全消INCB018424失的可能性越大；与初产妇相比，经产妇静脉血栓机化残留的可能性小。

小球藻(Chlorella)是一种绿色单细胞藻类,含有丰富的蛋白质,可作为生物活性肽的良好材料。生物体内活性氧过多会发生氧化应激反应,导致细胞或组织损伤。正常情况下内源性抗氧化防御系统起主导作用,但外源性抗氧化剂对于维持氧化损伤和抗氧化防御之间的自由基稳态同样至关重要。本文以小球藻为原料,通过酶解法制备小球藻蛋白抗氧化肽,探讨了消化过程中小球藻蛋白抗氧化肽的结构特征变化(微观结构、二级此网站结构以及氨基酸含量)及抗氧化活性,并对其进行分离纯化鉴定。研究内容及结果如下:(1)采用水提醇沉法提取小球藻脱脂粗蛋白,筛选四种蛋白酶应用于小球藻脱脂粗蛋白的酶解反应,确定最佳水解酶为碱性蛋白酶。通过单因素和响应面实验优化小球藻脱脂粗蛋白的酶解条件,得到最佳工艺条件:酶解温度55℃,p H值8.75,酶底比2.15%,在此条件下得到的酶解产物DPPH、ABTS、羟自由基清除率和亚铁离子螯合率分别为53.19±0.99%、76.86±0.28%、53.39±1.74%、22.56±2.97%。(2)利用INFOGEST模型对不同分子量小球藻多肽M_3(>3 k Da)和L_3(<3k Da)进行体外模拟消化,M_3和L_3多肽在胃肠消化过程中呈现网状结构,并且在胃肠道酶诱导下二级结构以β-折叠为主,赖氨酸表现出较好的耐消化性。L_3在胃部表现出更强的抗氧化活性,对DPPH自由基清除能力、亚铁离子螯合能力分别达到64.29±2.97%、71.68±2.97%,经过胃肠阶段消化后,疏水性氨基酸大量释放导致L_3多肽抗氧化活性下降,但L_3始终高于M_3。因此,分子量更小的L_3多肽表现出更好的胃肠消化稳定性和抗氧化活性。(3)小球藻抗氧化肽经超滤、Sephadex G-15凝胶色谱层析分离纯化后,所得C1组分(4 NK cell biologymg/m L)对DPPH自由基清除能力、亚铁离子螯合能力分别为59.62±1.29%、49.78±1.55%。经LC-MS/MS鉴定得到152种肽序列,通过肽活性评分和自由基清除活性预测及分子对接进一步筛选,最终确定了6种肽序列,并预测了多肽的理化性质、毒性和致敏性等性质,其中多肽SGHHKPL具有良好的消化稳定性、无Proteasome抑制剂毒性且水溶性好,SLPGGYGL、WHMHKTF无毒性且致敏性小,有望成为安全有效的抗氧化剂。